Antioksidan Lipozomlar - OKSANTE Ar

Antioksidan Lipozomlar
Prof.Dr. A. Suha Yalçın
Lipozomlar, tek veya iç içe geçmiş çok sayıda
tabaka ve bu tabakalar arasındaki sulu fazdan
oluşmuş küresel fosfolipit vesikülleridir.
1964 - Bangham
1970 Zar yapı ve fonksiyonları
Đlaç taşıyıcı sistemler
In vivo ve in vitro deneyler
Mathematics
Topology of two-dimensional surfaces in three-dimensional
space governed only by bilayer elasticity
Physics
Aggregation behaviour, fractals, soft and high-strength materials
Biophysics
Permeability, phase transitions in two-dimensions, photophysics
Physical Chemistry
Colloid behaviour in a system of well-defined physical
characteristics, inter- and intra-aggregate forces
Chemistry
Photochemistry, artificial photosynthesis, catalysis,
microcompartmentalization
Biochemistry
Reconstitution of membrane proteins into artificial membranes
Biology
Model biological membranes, cell function, fusion, recognition
Pharmaceutics
Studies of drug action
Medicine
Drug-delivery and medical diagnostics, gene therapy
Handbook of Biological Physics, Volume 1, ed. R. Lipowsky, E. Sackmann, 491, 1995.
Lipozomun lipit çift tabakası hücre zarı gibi diğer
çift tabakalı yapılar ile kolayca kaynaşır.
Bu yolla pek çok etken maddenin taşınması ve
aktarılması sağlanır.
Adsorpsiyon
Füzyon
Endositoz
Lipit transferi
Suggested mechanism of transition of interdigitated layer into
unilamellar liposomes through formation of interlayer stalk contacts.
BBA (2005) 1668: 117–125.
Çok tabakalı lipozomlar (MLV)
Bir çok lipit tabakası ve aralarında sulu tampon
çözelti (çapları 400-3,500 nm arası)
Tek tabakalı lipozomlar
Tek tabakalı küçük lipozomlar (SUV)
Sulu fazı çevreleyen tek bir lipit tabakası (çapları
20-50 nm arası)
Tek tabakalı büyük lipozomlar (LUV)
Sulu fazı çevreleyen tek bir lipit tabakası (çapları
200-1,000 nm arası)
(A), multilamellar vesicles, MLV (diameter typically 1 µm); (B), large unilamellar vesicles,
LUV (diameter 100 nm); (C), small (sonicated) unilamellar vesicles, SUV (diameter 30
nm); (D), multivesicular vesicles, MVV.
Biomolecular Engineering 18 (2001) 143–177
o
Lipozomlar kontrollü serbestleştiren sistemlere
benzer özelliklere sahiptir.
o
Lipozomlanmış ilaçlar kullanıldığında
1)
2)
3)
4)
çok daha düşük dozda farmakolojik etki sağlanır.
hastanın sık sık ilaç alma gereği azalır.
ilacın yan etkileri, toksisitesi ve allerjik etkileri azalır.
ilacın istenilen sürede serbestleşmesi sağlanır.
o
Lipozomların diğer kontrollü serbestleştiren
sistemlere üstünlükleri
1) Doğal yapıtaşı olan fosfolipitlerden oluşurlar.
2) Kendileri veya yıkım ürünleri immünojenik ve toksik değildir.
3) Bazı yapısal eklentilerle etkinin istenen bölgeye
hedeflenmesi sağlanabilir.
4) Biyolojik olarak yıkımları mümkündür.
Handbook of Biological Physics, Vol. 1,
Ed.: R. Lipowsky, E. Sackmann, p. 491, 1995.
Liposome Utility Current Applications
Disease States Treated
Solubilization
Amphotericin B, minoxidil
Fungal infections
Site-Avoidance
Amphotericin B – reduced nephrotoxicity,
doxorubicin – decreased cardiotoxicity
Fungal infections, cancer
Sustained-Release
Systemic antineoplastic drugs, hormones,
corticosteroids, drug depot in the lungs
Cancer, biotherapeutics
Drug protection
Cytosine arabinoside, interleukins
Cancer, etc.
RES Targeting
Immunomodulators, vaccines, antimalarials,
macrophage-located diseases
Cancer, MAI, tropical
parasites
Specific Targeting
Cells bearing specific antigens
Wide therapeutic
applicability
Extravasation
Accumulation
Leaky vasculature of tumours, inflammations,
infections
Prostaglandins
Cancer, bacterial
infections
Cardiovascular diseases
Penetration
Topical vehicles
Dermatology
Drug Depot
Lungs, sub-cutaneous, intra-muscular, ocular
Wide therapeutic
applicability
Lipozomlanmış ilaçlar
Antikanser
Antibakteriyel Antiviral, DNA Enzim
Radyonüklid
Fungisit, Aşı
Duanorubicin, Doxorubicin*, Epirubicin
Methotrexate, Cisplatin*, Cytarabin
Triclosan, Clindamycin hydrochloride,
Ampicillin, peperacillin, rifamicin
AZT, cDNA - CFTR*
Hexosaminidase A, Glucocerebrosidase, Peroxidase
In-111*, Tc-99m
Amphotericin B* Malaria merozoite, sporozoite,
Hepatitis B antigen, Rabies virus glycoprotein
* Klinik araştırma aşaması: devam ediyor/tamamlanmış.
Nanobiocolloids - Liposomes
by Paul Fletcher as part of Module 06547 Advanced
Topics in Nanotechnology
Cosmetic creams, e.g. Alpha Lipoic Acid Cream Details:
Alpha Lipoic Acid ... the new, ultra-potent antioxidant (said to be 400 times more
potent than C or E) not only helps fight future skin damage but also helps repair
past damage. DMAE is called "facelift in a jar" for its ability to help tighten, firm
and tone facial and throat skin ... quickly. And Vitamin C Ester boosts anti-free
radical action! All in a loposome to aid penetration. Plus other nutrients that
contribute to its dramatic results.
Ingredients: Demineralized spring water, glyceryl stearate, soybean oil, stearyl,
vegetable oil, cetyl alcohol, soy phospholipid liposome gel, alpha lipoic acid,
DMAE bitartrate, ascorbyl palmitate (vit C ester), whole wheat protein,
tocopheryl acetate (vit E), retinyl palmitate (vit A), ergocalciferol (vit D), aloe vera
gel, allantoin, citric acid, polysorbate 20, simethicone, xanthan gum,
methylparaben, propyparaben, imidazolidinyl urea.
Cryo-SEM micrographs of liposomes containing glutathione (bars: 1 micrometer).
The images obtained show the arrays of inner lipid layers typical of MLV.
There are indications of the presence of GSH contents both within the central cores
and between the lamella of liposomes.
Cell. Mol. Biol. Lett. 2004, Vol. 9, Supplement 2, 101-102.
Kompleks bir biyolojik sıvı olan sütün
bileşiminde su, yağ, protein (kazein miselleri
ve süt serumu proteinleri), karbohidrat (esas
olarak laktoz) ve diğer biyoaktif bileşenler
(mineraller, vitaminler ve enzimler) bulunur.
Peynir üretimi sırasında sütteki kazeinin
çöktürülmesiyle açığa çıkan sıvı “peynir
altı suyu (whey)” olarak adlandırılır.
Peynir altı suyundaki çözünür proteinlere
süt serumu proteinleri de denmektedir.
Peynir altı suyu toz haline getirilerek gıda
endüstrisinde kullanılır.
Majör proteinler:
β-laktoglobulin, α-laktalbümin, serum albümin
Đmmünoglobülinler, glikomakropeptit
Minör proteinler:
Laktoperoksidaz, laktoferrin, mikroglobulin
Lizozim, Đnsülin-benzeri büyüme faktörü (IGF)
γ-globulinler
Konsantrasyon
(g/L)
Biyolojik Aktivite
Kazeinler
28
ĐyonTaşıyıcı, Biyoaktif peptid
öncüsü
β-laktoglobulin
1.3
Yağ asidi bağlayıcı, Antioksidan
α-laktalbümin
1.2
Laktoz sentezi, Ca taşıyıcı,
Đmmünomodülasyon,
Antikarsinojenik
Đmmünoglobülinler
0.7
Đmmün koruma
Glikomakropeptid
1.2
Đmmünomodülasyon, Antiviral
Laktoferrin
0.1
Antimikrobiyal, Antiviral,
Antioksidan, Antikarsinojenik,
Antitoksin, Antienflamatuar,
Đmmünomodülasyon
Laktoperoksidaz
0.03
Antimikrobiyal
β-laktoglobulin
Đki internal disülfit bağı ve
bir serbest tiyol grubu
içeren nonkovalent olarak
bağlı dimer yapıdadır.
Hidrojen bağlarından
veya elektrostatik
etkileşimden sorumlu
kalıntıların değişmesi,
monomer-dimer
durumunda değişikliğe
yol açmaktadır.
α-laktalbümin
α-laktalbümin, birbirine Ca+2 bağlayıcı bölge ile
bağlı 2 kısımdan oluşur:
büyük α-sarmal
küçük β-tabaka
Süt serumu proteinlerinin eldesi
% 6’lık PAST süspansiyonu (ultra saf suda)
Santrifüj (4,000 g, / 4ºC / 60 dakika)
Supernatan
Çökelti
Filtrasyon
Kromatografi
β-Lg
F-1
F-2
F-3
tripsin
α-La
Lipozomlanmış süt proteini ve süt proteini hidrolizatlarında
üç farklı yöntemle yapılan antioksidan aktivite ölçümleri
0,300
0,250
0,200
WP
WPH
0,150
WP-L
WPH-L
0,100
0,050
0,000
A-450
A-515
RLU/10*6
DPPH
CUPRAC
CL
Antioksidan Savunma
Antioksidanlar hedef moleküllerdeki
oksidatif hasarı engelleyen veya geciktiren
maddelerdir.
Antioksidan moleküller:
Enzimler.
Proteinler.
Küçük moleküller.
R
AO
Oksidatif stres ve antioksidan tedavi konusunda araştırma ve geliştirme, laboratuvar
çalışmaları ve analiz hizmetleri yapmayı, doğal ürünler ve antioksidanlar geliştirmeyi ve
bunları klinik uygulamaya sunmayı amaçlayan bir biyoteknoloji şirketidir.
Faaliyet ve Hizmet Alanları:
Ar-Ge ve laboratuvar çalışmaları; oksidatif stresin tanı ve tedavisi; epidemiyolojik
çalışmalar; önleyici tıp uygulamaları; doğal ürünler ve antioksidanların geliştirilmesi
LABORATUVARIMIZDA
UYGULANAN / GELĐŞTĐRĐLEN TESTLER
Malondialdehit
(MDA)
Lipit Hidroperoksitleri
(LOOH)
Protein Karbonilleri
(PCO)
DNA Hasarı
(8-OH-dG)
Glutatyon
(GSH/GSSG)
Glutatyon Peroksidaz
(GSH-Px)
Glutatyon Redüktaz
(GSH-Red)
Glutatyon Transferaz
(GSH-Tr)
Katalaz
(CAT)
Süperoksit dismütaz
(SOD)
Paraoksonaz
(PON)
Miyeloperoksidaz
(MPO)
Albumin
Transferrin
COMET Assay
Seruloplazmin
Tokoferoller
Karotenoidler
LABORATUVARIMIZDA
MEVCUT / KULLANILAN CĐHAZLAR
Laboratuvarımızda tez çalışmalarınızın,
bilimsel araştırma ve projelerinizin, ve
diğer Ar-Ge çalışmalarınızın gerektirdiği
her türlü laboratuvar hizmetini vermek
ve çözüm ortağınız olmak isteriz.
Laboratuvarımız, üniversitelerde, sağlık
bakanlığına bağlı poliklinik, hastane ve
benzeri kuruluşlarda, ilaç endüstrisinde
ve diğer resmi/özel laboratuvarlarda
çalışan araştırıcılarla her türlü işbirliğine
açıktır.
PERKIN ELMER
LAMBDA 25
SPEKTROFOTOMETRE (UV/VIS)
PERKIN ELMER
SERIES 200
HPLC
(UV/VIS)
PERKIN ELMER
VICTOR 3
MICROPLATE
READER
(ABS-FLO-LUM)
OLYMPUS
VANNOX
AHB53
ARAŞTIRMA
MĐKROSKOBU
ABBOTT
MOLECULAR
THERMOBRITE
STAT SPIN
GENEAMP
PCR SYSTEM
9700
BINDER
CO2 ETÜV
NUAIRE CLASS
II LAMINAR
FLOW
Oksante Ar-Ge ve Üretim Laboratuvarı, Kemal Nehrozoğlu Caddesi, GOSB Teknopark Üretim Binası 1 No: 3, 41480 Gebze-Kocaeli
info@oksante.com.tr
Tel: 90 262 751 45 33 Faks: 90 262 751 45 34 www.oksante.com.tr
ARAŞTIRMA PROJELERĐ
Proje Adı
Başlangıç ve bitiş tarihleri
Bütçesi
Destekleyen kuruluş
Proje Adı
Başlangıç ve bitiş tarihleri
Bütçesi
Destekleyen kuruluş
Đdrarda malondialdehit ölçüm kitinin
geliştirilmesi
01.07.2007 – 31.12.2008
300,000 YTL
TÜBĐTAK-TEYDEB
Lipozomlanmış antioksidan moleküllerin üretimi
01.12.2008 – 31.05.2010
400,000 YTL
TÜBĐTAK-TEYDEB